Antigenni qidirish - Antigen retrieval

Bilan saqlanib qolgan to'qimalar formaldegid, yuqori reaktiv birikma tarkibida turli xil kimyoviy modifikatsiyalar mavjud bo'lib, ular biomedikal protseduralarda oqsillarni aniqlanishini kamaytirishi mumkin. immunohistokimyo. Antigenni qidirish bu kimyoviy modifikatsiyani kamaytirish yoki yo'q qilishga yondashuv. Ning ikkita asosiy usuli antigen qidirish issiqlik vositachiligida amalga oshiriladi epitop qidirish (HIER) va proteolitik epitopni qidirib topish (PIER).

Proteaz tomonidan epitopni olish (PIER)

PIERda uning epitopiga antitel bilan bog'lanishini tiklash uchun Proteinaz K, Tripsin va Pepsinni o'z ichiga olgan fermentlar ishlatilgan. Ta'sir mexanizmi - bu epitopni niqoblaydigan peptidlarning parchalanishi, antigenlikni tiklash.

PIERning kamchiliklari orasida immunoreaktivlikni tiklash uchun past muvaffaqiyat darajasi, to'qima morfologiyasi va qiziqish antigenining potentsial yo'q qilinishi kiradi.

Issiqlik bilan epitopni olish (HIER)

HIER ba'zi bir o'zaro bog'liqliklarni teskari yo'naltiradi va epitopning uchinchi darajali tuzilishini tiklashga imkon beradi.[1] Protokol o'rganish uchun har bir to'qima, fiksatsiya usuli va antigeni uchun optimallashtirishni talab qiladi.

Umuman olganda, HIER PIERga qaraganda ancha yuqori muvaffaqiyat darajasiga ega. HIERni mikroto'lqinli pechlar, bosimli pishirgichlar, sabzavotli bug 'idishlari, avtoklavlar yoki suv hammomlari bilan bajarish mumkin. HIER - vaqt, harorat, bufer va pHga sezgir.

Xona harorati epitopini olish (RTER)

RTER xlorid kislota (pH 1) yoki formik kislota (pH 2) kabi kislotalardan foydalangan holda o'zaro bog'liqliklarni qaytarishni o'z ichiga oladi.

Adabiyotlar

  1. ^ "Antigenni qidirish usullari". Ar-ge tizimlari. Olingan 20 mart 2019.