Cheklov fermenti vositachiligida integratsiya - Restriction enzyme mediated integration

Cheklov fermenti vositachiligida integratsiya (qisqartirilgan REMI) - bu integratsiya texnikasi DNK (chiziqli plazmid ) xuddi shu narsa tomonidan yaratilgan genom saytlariga cheklash fermenti DNKning linearizatsiyasi uchun ishlatiladi.[1] Plazmid integratsiyasi tegishli saytlarda sodir bo'ladi genom, ko'pincha plazmid linearizatsiyasi uchun ishlatiladigan cheklash fermenti bilan tanib olish joylarini qayta tiklash orqali.

Mexanizm

Maxsus cheklash fermenti genomik DNKni tasodifiy nuqtalarda ajratadi va tanib olish joylarini hosil qiladi.[2] Kiritiladigan DNK fragmenti xuddi shu cheklash fermenti va hujayraga AOK qilingan aralashma yordamida DNK bo'lagi muvaffaqiyatli ravishda joylashtirilib linearizatsiya qilinadi.[3]

Ilovalar

REMI usuli ishlab chiqarish uchun ishlatilgan genetik jihatdan o'zgartirilgan organizmlar shu jumladan Saccharomyces cerevisiae, Dictyostelium discoideum va Ksenopus laevis.[1][4][5]

Genom muhandisligi

REMI keng ko'lamda ishlatilgan transgenez yilda X. laevis turli xil signalizatsiya yo'llarini, shu jumladan FGF va Qalqonsimon bez tizim.[3][6]

Adabiyotlar

  1. ^ a b Schiestl, R. H .; Petes, T. D. (1991-09-01). "Saccharomyces cerevisiae-da noqonuniy rekombinatsiya bilan DNK fragmentlarini birlashtirish". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 88 (17): 7585–7589. doi:10.1073 / pnas.88.17.7585. ISSN  0027-8424. PMC  52346. PMID  1881899.
  2. ^ Kessler, C .; Manta, V. (1990-08-16). "Cheklash endonukleazalari va DNK modifikatsiyasining metiltransferazlarning o'ziga xos xususiyati (3-nashr)". Gen. 92 (1–2): 1–248. doi:10.1016 / 0378-1119 (90) 90486-b. ISSN  0378-1119. PMID  2172084.
  3. ^ a b Kroll, K. L .; Amaya, E. (1996-10-01). "Spermatozoidlarning yadro transplantatsiyasidan transgenik Ksenopus embrionlari gastrulyatsiya paytida FGF signalizatsiyasi talablarini aniqlaydi". Rivojlanish. 122 (10): 3173–3183. ISSN  0950-1991. PMID  8898230.
  4. ^ Kuspa, A .; Loomis, W. F. (1992-09-15). "Diktiyosteliya rivojlanish genlarini plazmidli DNKning fermentlar vositachiligi bilan cheklash orqali belgilash". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 89 (18): 8803–8807. doi:10.1073 / pnas.89.18.8803. ISSN  0027-8424. PMC  50009. PMID  1326764.
  5. ^ Chumchuq, Dunkan B.; Latinkich, Branko; Mohun, Tim J. (2000-02-15). "Transgenik Ksenopus yaratishning soddalashtirilgan usuli". Nuklein kislotalarni tadqiq qilish. 28 (4): e12. doi:10.1093 / nar / 28.4.e12. ISSN  0305-1048. PMC  102591. PMID  10648800.
  6. ^ Turk, Natali; Palmier, Karima; Le Mevel, Sebastyan; Alliot, Kerolin; Demeneix, Barbara A. (2005-11-01). "Premetamorfik Ksenopus Tadpolesida qalqonsimon bezovta qiluvchi moddalarning transkripsiyaviy ta'sirini tekshirish bo'yicha tezkor, fiziologik protokol". Atrof muhitni muhofaza qilish istiqbollari. 113 (11): 1588–1593. doi:10.1289 / ehp.7992. ISSN  0091-6765. PMC  1310923. PMID  16263516.