Spektrofotometriya - Spectrophotometry

Stol usti spektrofotometri
Bekman IR-1 spektrofotometri, taxminan. 1941 yil
Bekman modeli JB spektrofotometri (ikki nurli model), 1960 yil
Grafika sanoatida ishlatiladigan qo'l spektrofotometri.[1]

Spektrofotometriya ning filialidir elektromagnit spektroskopiya to'lqin uzunligining funktsiyasi sifatida materialning aks etishi yoki uzatish xususiyatlarini miqdoriy o'lchash bilan bog'liq.[2] Spektrofotometriyadan foydalaniladi fotometrlar, spektrofotometrlar deb nomlanuvchi, har xil to'lqin uzunliklarida yorug'lik nurining intensivligini o'lchashi mumkin. Spektrofotometriya odatda ultrabinafsha rangga nisbatan qo'llanilsa ham, ko'rinadigan va infraqizil zamonaviy spektrofotometrlar keng maydonlarini so'roq qilishlari mumkin elektromagnit spektr, shu jumladan rentgenogramma, ultrabinafsha, ko'rinadigan, infraqizil va / yoki mikroto'lqinli pech to'lqin uzunliklari.

Umumiy nuqtai

Spektrofotometriya - bu rangli birikmalar qancha yorug'lik yutishiga qarab, molekulalarning miqdoriy tahliliga bog'liq bo'lgan vosita. Spektrofotometrlarning muhim xususiyatlari - spektral o'tkazuvchanlik kengligi (sinov namunasi orqali o'tkazishi mumkin bo'lgan ranglar diapazoni), namuna o'tkazishning foiz darajasi, namunani yutish logaritmik diapazoni va ba'zan aks ettirishni o'lchash foizidir.

Spektrofotometr odatda eritmalar, shaffof yoki shaffof bo'lmagan qattiq moddalar, masalan, sayqallangan shisha yoki gazlarning o'tkazuvchanligini yoki aksini o'lchash uchun ishlatiladi. Ko'pgina biokimyoviy moddalar, xuddi ular singari, rangli ko'rinishga ega bo'lsa-da, ular ko'rinadigan yorug'likni yutadi va shuning uchun kolorimetrik protseduralar bilan o'lchanishi mumkin, hatto rangsiz biokimyoviy moddalar ham xlorogen rang hosil qiluvchi reaktsiyalar uchun mos rangli birikmalarga aylanib, kolorimetrik tahlil uchun mos birikmalar hosil qiladi.[3]:65 Biroq, ular o'lchash uchun ham tuzilishi mumkin diffuzivlik ro'yxatga olingan har qanday yorug'lik diapazonida, odatda 200 nm - 2500 nm atrofida turli xil boshqaruv elementlari va kalibrlash.[2] Ushbu yorug'lik oralig'ida, turiga qarab turlicha bo'lgan standartlardan foydalangan holda mashinada kalibrlashlar zarur to'lqin uzunligi ning fotometrik aniqlash.[4]

Spektrofotometriya qo'llaniladigan eksperimentga misol eritmaning muvozanat konstantasini aniqlashdir. Eritma ichidagi ma'lum bir kimyoviy reaktsiya oldinga va teskari yo'nalishda sodir bo'lishi mumkin, bu erda reaktivlar mahsulot hosil qiladi va mahsulotlar reaktivlarga aylanadi. Ba'zi vaqtlarda ushbu kimyoviy reaktsiya muvozanat nuqtasi deb nomlangan muvozanat nuqtasiga etadi. Ushbu nuqtada reaktiv moddalar va mahsulotlarning tegishli kontsentratsiyasini aniqlash uchun eritmaning nur o'tkazuvchanligini spektrofotometriya yordamida sinab ko'rish mumkin. Eritma orqali o'tadigan yorug'lik miqdori yorug'lik o'tishiga imkon bermaydigan ba'zi kimyoviy moddalarning kontsentratsiyasidan dalolat beradi.

Yorug'likning yutilishi yorug'likning elektron va tebranish rejimlari bilan molekulalarning o'zaro ta'siri bilan bog'liq. Har bir molekula turi o'zining kimyoviy bog'lanishlari va yadrolari bilan bog'liq bo'lgan energiya darajalarining individual to'plamiga ega va shu bilan o'ziga xos to'lqin uzunlikdagi nurlarni yoki energiyani yutadi, natijada noyob spektral xususiyatlarga ega bo'ladi.[5] Bu uning o'ziga xos va aniq makiyajiga asoslanadi.

Spektrofotometrlardan foydalanish turli xil ilmiy sohalarni qamrab oladi, masalan fizika, materialshunoslik, kimyo, biokimyo, Kimyo muhandisligi va molekulyar biologiya.[6] Ular ko'plab sanoat tarmoqlarida, jumladan yarimo'tkazgichlarda, lazer va optik ishlab chiqarishda, bosmaxona va sud ekspertizasida, shuningdek kimyoviy moddalarni o'rganish laboratoriyalarida keng qo'llaniladi. Spektrofotometriya ko'pincha ferment faolligini o'lchashda, oqsil kontsentratsiyasini aniqlashda, fermentativ kinetik konstantalarni aniqlashda va ligand bilan bog'lanish reaktsiyalarini o'lchashda qo'llaniladi.[3]:65 Pirovardida, spektrofotometr nazoratga yoki kalibrlashga qarab, nishonda qanday moddalar borligini va kuzatilgan to'lqin uzunliklarini hisoblash orqali aynan qancha ekanligini aniqlashga qodir.

Yilda astronomiya, spektrofotometriya atamasi spektrni o'lchash a samoviy ob'ekt unda oqim spektri miqyosi funktsiyasi sifatida kalibrlangan to'lqin uzunligi, odatda spektrofotometrik standart yulduzni kuzatish bilan taqqoslaganda va Yer atmosferasi tomonidan nurni yutishi uchun tuzatilgan.[7]

Tarix

Tomonidan ixtiro qilingan Arnold O. Bekman 1940 yilda[bahsli ], spektrofotometr o'zining hamkasblari yordamida 1935 yilda tashkil etilgan "National Technical Laboratories" kompaniyasida yaratilgan bo'lib, u Bekman Instrument Kompaniyasiga aylanadi. Bekman Kulter. Bu ultrafioletni to'g'ri singdira olmaydigan ilgari yaratilgan spektrofotometrlarga echim bo'ladi. U ultrabinafsha nurlarini yutish uchun shisha prizma ishlatilgan A modeli ixtirosidan boshlanadi. Bu qoniqarli natija bermaganligi aniqlangan edi, shuning uchun B modelida stakandan kvarts prizmasiga o'tish bor edi, bu esa yaxshi yutilish natijalariga imkon berdi. U erdan Model S to'lqin uzunlik o'lchamlarini sozlash bilan dunyoga keldi, natijada uning uchta bo'lagi ishlab chiqarildi. Oxirgi va eng ommabop model D modeli bo'ldi, u hozirgi kunda tanilgan DU spektrofotometri asboblar qutisi, ultrabinafsha uzluksiz va yaxshiroq monoxromatorli vodorodli chiroq.[8] U 1941 yildan 1976 yilgacha ishlab chiqarilgan bo'lib, uning narxi 1941 yilda bo'lgan AQSH$ 723 (ultrabinafsha aksessuarlari qo'shimcha narxga ega edi). Nobel kimyo laureati so'zlari bilan aytganda Bryus Merrifild, bu "biologik ilm-fanni rivojlantirish yo'lida ishlab chiqilgan eng muhim vosita edi".[9]

1976 yilda to'xtatilganidan so'ng,[10] Hewlett-Packard 1979 yilda HP 8450A nomi bilan tanilgan birinchi sotuvga qo'yiladigan diod-massiv spektrofotometrini yaratdi.[11] Diod-massivli spektrofotometrlar Bekman tomonidan yaratilgan dastlabki spektrofotometrdan farq qilar edi, chunki u bir necha to'lqin uzunligini bir necha soniya ichida skanerlagan birinchi nurli mikroprotsessor bilan boshqariladigan spektrofotometr edi. U namunani xususiyatlariga qarab singdiradigan polixromatik nur bilan nurlantiradi. Keyin u spektrning to'lqin uzunligi mintaqasini aniqlaydigan fotodiodlar majmuasini panjara orqali qaytariladi.[12] O'shandan beri spektrofotometriya moslamalarini yaratish va amalga oshirish nihoyatda ko'paygan va hozirgi zamonning eng innovatsion vositalaridan biriga aylangan.

Dizayn

Yagona nurli skanerlash spektrofotometri

Qurilmalarning ikkita asosiy klassi mavjud: bitta nurli va ikkita nurli. Ikkita nurli spektrofotometr[13] ikkita yorug'lik yo'li orasidagi yorug'lik intensivligini taqqoslaydi, ulardan biri mos yozuvlar namunasini, ikkinchisi sinov namunasini o'z ichiga oladi. Bir nurli spektrofotometr sinov namunasi kiritilgunga qadar va keyin nurning nisbiy yorug'lik intensivligini o'lchaydi. Ikki nurli asboblardan taqqoslash o'lchovlari osonroq va barqarorroq bo'lishiga qaramay, bitta nurli asboblar katta dinamik diapazonga ega bo'lishi mumkin va optik jihatdan sodda va ixchamdir. Bundan tashqari, spektrofotometrlar kabi ba'zi bir maxsus asboblar mikroskoplar yoki teleskoplar, amaliyligi sababli bitta nurli asboblardir.

Tarixiy jihatdan spektrofotometrlarda a monoxromator o'z ichiga olgan difraksion panjara analitik spektrni ishlab chiqarish. Panjara harakatlanuvchi yoki o'rnatilishi mumkin. Agar bitta detektor bo'lsa, masalan fotoko‘paytiruvchi naycha yoki fotodiod ishlatiladi, panjarani bosqichma-bosqich skanerlash mumkin (skanerlash spektrofotometri), shunda detektor har bir to'lqin uzunligida yorug'lik intensivligini o'lchashi mumkin (bu har bir "qadam" ga to'g'ri keladi). Detektorlar massivi (massiv spektrofotometri), masalan ulangan qurilmalarni zaryadlang (CCD) yoki fotodiodli massivlar (PDA) dan ham foydalanish mumkin. Bunday tizimlarda panjara o'rnatiladi va yorug'likning har bir to'lqin uzunligining intensivligi massivdagi boshqa detektor bilan o'lchanadi. Bundan tashqari, aksariyat zamonaviy o'rta infraqizil spektrofotometrlar a dan foydalanadilar Furye konvertatsiyasi spektral ma'lumotni olish texnikasi. Ushbu uslub deyiladi Fourier transform infraqizil spektroskopiyasi.

Transmissiya o'lchovlarini o'tkazishda spektrofotometr mos yozuvlar eritmasi va sinov eritmasi orqali o'tadigan yorug'lik qismini miqdoriy jihatdan taqqoslaydi, so'ngra ikkita signalning intensivligini elektron tarzda taqqoslaydi va namunaning mos yozuvlar standartiga nisbatan o'tkazilish foizini hisoblab chiqadi. Yansıtıcılık o'lchovlari uchun, spektrofotometre, mos yozuvlar va sinov namunalarida aks etadigan yorug'lik qismini miqdoriy jihatdan taqqoslaydi. Resurs lampadan yorug'lik monoxromator orqali o'tadi, u nurni aylanadigan prizma orqali to'lqin uzunliklarining "kamalagi" ga diffraktsiya qiladi va monoxromatorning chiqish tomonidagi mexanik yoriq orqali shu tarqoq spektrning tor o'tkazuvchanlik kengligini chiqaradi. Ushbu tarmoqli kengligi sinov namunasi orqali uzatiladi. Keyin fotodiod yordamida foton oqimining zichligi (har kvadrat metr uchun kvadrat metrga teng), ulangan qurilmani zaryadlang yoki boshqa yorug'lik sensori. The o'tkazuvchanlik yoki aks ettirish sinov namunasining har bir to'lqin uzunligi uchun qiymat mos yozuvlar namunasidan uzatish yoki aks ettirish qiymatlari bilan taqqoslanadi. Ko'pgina asboblar namunaning "yutish qobiliyatini" hisoblash uchun chiziqli o'tkazuvchanlik koeffitsientiga logaritmik funktsiyani qo'llaydi, bu qiymat o'lchanadigan kimyoviy moddalarning "kontsentratsiyasi" ga mutanosibdir.

Qisqacha aytganda, skanerlash spektrofotometridagi hodisalar ketma-ketligi quyidagicha:

  1. Yorug'lik manbai monoxromatorga porlanadi, kamalakka tarqaladi va ikkita nurga bo'linadi. Keyin namuna va mos yozuvlar echimlari orqali skanerdan o'tkaziladi.
  2. Tushayotgan to'lqin uzunliklarining qismlari namuna va ma'lumotnoma orqali uzatiladi yoki aks ettiriladi.
  3. Natijada paydo bo'lgan yorug'lik fotodetektor solishtiradigan qurilma nisbiy intensivlik ikkita nurning
  4. Elektron sxemalar nisbiy oqimlarni chiziqli uzatish foizlariga va / yoki yutilish / kontsentratsiya qiymatlariga aylantiradi.

Massiv spektrofotometrida ketma-ketlik quyidagicha:[14]

  1. Yorug'lik manbai namunaga porlanib, yoriqqa yo'naltirilgan
  2. O'tkazilgan yorug'lik aks etuvchi panjara bilan kamalakka singan
  3. Olingan yorug'lik nurning intensivligini taqqoslaydigan fotodetektor qurilmasiga tushadi
  4. Elektron sxemalar nisbiy oqimlarni chiziqli uzatish foizlariga va / yoki yutilish / kontsentratsiya qiymatlariga aylantiradi

Detektorda ikkita nurlanishning bo'sh oqimini muvozanatlash uchun ko'plab eski spektrofotometrlarni "nollash" deb nomlangan protsedura bo'yicha sozlash kerak. Yo'naltiruvchi moddaning uzatilishi dastlabki (datum) qiymat sifatida o'rnatiladi, shuning uchun boshqa barcha moddalarning uzatilishi dastlabki "nollangan" moddaga nisbatan qayd qilinadi. Keyin spektrofotometr uzatish koeffitsientini 'so'ruvchanlikka' o'zgartiradi, dastlabki namunaga nisbatan sinov namunasining o'ziga xos tarkibiy qismlarining kontsentratsiyasi.[6]

Biokimyo fanidan dasturlar

Spektrofotometriya DNK, RNK va oqsil izolatsiyasi, fermentlar kinetikasi va biokimyoviy tahlillarni o'z ichiga olgan ko'plab biokimyoviy tajribalarda qo'llaniladigan muhim usuldir.[15] Ushbu dasturlardagi namunalar juda ko'p miqdorda mavjud emasligi sababli, ular ushbu buzilmaydigan texnikada tahlil qilish uchun juda mos keladi. Bundan tashqari, to'liq tahlillar uchun 1uL namuna talab qilinadigan mikro hajmli platformadan foydalanib, qimmatbaho namunani tejash mumkin.[16] Spektrofotometriya protsedurasini qisqacha tushuntirishga rangli birikmani o'z ichiga olmagan bo'sh namunaning changni yutish qobiliyatini rangli birikmani o'z ichiga olgan namunaga solishtirish kiradi. Ushbu rangni 595 nm da o'lchangan Coomasie Brilliant Blue G-250 bo'yoq kabi bo'yoq yoki b-galaktosidaza va ONPG (420 nm da o'lchangan namunalar sarg'aygan) o'rtasida ko'rinadigan fermentativ reaktsiya bilan amalga oshirish mumkin.[3]:21–119 Spektrofotometr yorug'lik ko'rinadigan hududida (350 nm dan 800 nm gacha) rangli birikmalarni o'lchash uchun ishlatiladi,[3]:65 shuning uchun u o'rganilayotgan modda haqida ko'proq ma'lumot topish uchun ishlatilishi mumkin. Biyokimyasal tajribalarda kimyoviy va / yoki fizik xususiyat tanlanadi va namuna haqida ko'proq ma'lumot olish uchun, masalan, miqdori, tozaligi, ferment faolligi va boshqalar kabi spektrofotometriyadan foydalanish uchun ishlatiladigan protsedura ushbu xususiyatga xosdir. namunalarning optimal to'lqin uzunligini yutish qobiliyatini aniqlash, namunalarni yutish uchun maqbul pH qiymatini aniqlash, noma'lum namunalarning konsentratsiyasini aniqlash va har xil namunalarning pKa-ni aniqlash kabi bir qator usullar uchun.[3]:21–119 Spektrofotometriya, shuningdek, oqsillarni tozalash uchun foydali jarayondir[17] va aralashmaning optik tahlillarini yaratish usuli sifatida ham foydalanish mumkin. Spektrofotometrik ma'lumotlar, shuningdek, Ber-Lambert tenglamasi bilan birgalikda ishlatilishi mumkin, , o'tkazuvchanlik va kontsentratsiya va yutilish va kontsentratsiya o'rtasidagi turli xil munosabatlarni aniqlash uchun.[3]:21–119 Spektrofotometr birikmaning to'lqin uzunligini uning rangi orqali o'lchaganligi sababli, rangni o'zgartirishi va o'lchanishi uchun bo'yoq biriktiruvchi moddalar qo'shilishi mumkin.[18] Har bir komponentning standart eritmalarining yutilish spektrlari yordamida ikkita komponentli aralashmaning kontsentratsiyasini bilish mumkin. Buning uchun ushbu aralashmaning ikkita to'lqin uzunligida yo'q bo'lish koeffitsientini va ikkita komponentning ma'lum og'irliklarini o'z ichiga olgan eritmalarning yo'q bo'lish koeffitsientlarini bilish kerak.[19] Spektrofotometrlar o'nlab yillar davomida ishlab chiqilgan va takomillashtirilgan va kimyogarlar orasida keng qo'llanilgan. Bundan tashqari, spektrofotometrlar ultrabinafsha yoki ko'rinadigan yorug'lik to'lqin uzunligini yutish qiymatlarini o'lchashga ixtisoslashgan.[3]:21–119 Bu juda aniq vosita, shuningdek juda sezgir va shuning uchun nihoyatda aniq, ayniqsa rang o'zgarishini aniqlashda.[20] Ushbu usul laboratoriya tajribalarida foydalanish uchun ham qulaydir, chunki bu arzon va nisbatan sodda jarayon.

UV nurli ko'rinadigan spektrofotometriya

Spektrofotometrlarning aksariyati UV nurlari va ko'rinadigan spektr mintaqalari va ushbu asboblarning bir qismi ham yaqininfraqizil mintaqada ham. Oqsilning konsentratsiyasini triptofan, tirozin va fenilalanin borligi sababli OD ni 280 nm da o'lchash orqali aniqlash mumkin. Bu usul unchalik aniq emas, chunki oqsillarning tarkibi juda xilma-xil va bu aminokislotalarning birortasi bo'lmagan oqsillar 280 nm maksimal yutilishga ega emas. Nuklein kislotasining ifloslanishi ham xalaqit berishi mumkin. Ushbu usul uchun ultrabinafsha mintaqada kvarts kyuvetalari bilan o'lchashga qodir spektrofotometr kerak.[3]:135

Ultraviyole ko'rinadigan (UV-vis) spektroskopiya elektron o'tishni qo'zg'atadigan energiya darajasini o'z ichiga oladi. UV nurlarini yutish asosiy holatdagi molekulalarni qo'zg'aladigan holatlariga qo'zg'atadi.[5]

Ko'rinadigan mintaqada 400-700 nm spektrofotometriya keng qo'llaniladi kolorimetriya fan. Ma'lumki, u 0,2-0,8 OD diapazonida eng yaxshi ishlaydi, siyoh ishlab chiqaruvchilari, matbaa kompaniyalari, to'qimachilik mahsulotlari sotuvchilari va boshqa ko'plab narsalar kolorimetriya orqali taqdim etilgan ma'lumotlarga muhtoj. Ular ko'rinadigan mintaqa bo'ylab har 5-20 nanometrda o'qishni olib, a hosil qiladi spektral aks ettirish egri yoki muqobil taqdimotlar uchun ma'lumotlar oqimi. Ushbu egri chiziqlar ranglarning yangi partiyasini texnik xususiyatlarga mos kelishini tekshirish uchun ishlatilishi mumkin, masalan, ISO bosib chiqarish standartlari.

An'anaviy ko'rinadigan mintaqaviy spektrofotometrlar rang beruvchi yoki asosiy materialning lyuminestsentsiyaga ega ekanligini aniqlay olmaydi. Bu, masalan, bir yoki bir nechta bosma siyoh lyuminestsent bo'lsa, rang muammolarini boshqarishni qiyinlashtirishi mumkin. Kolorant tarkibida lyuminestsentsiya bo'lgan joyda, a ikki spektral lyuminestsent spektrofotometr ishlatilgan. D / 8 (sferik) va 0/45 vizual spektrli spektrofotometrlar uchun ikkita asosiy sozlash mavjud. Ismlar yorug'lik manbai, kuzatuvchi va o'lchov kamerasining ichki geometriyasi bilan bog'liq bo'lib, olimlar ushbu asbob yordamida namunadagi birikmalar miqdorini o'lchaydilar. Agar birikma ko'proq konsentrlangan bo'lsa, ko'proq namuna namlikni yutadi; kichik diapazonlarda Pivo-Lambert qonuni namunalar orasidagi yutilish darajasi kontsentratsiyaga qarab o'zgarib turadi. Bosib chiqarishda o'lchovlar paytida uv filtrsiz / uvletkasiz ikkita muqobil parametr ishlatiladi.

METTLER TOLEDO UV5Nano mikro hajmli spektrofotometr

Namunalar odatda tayyorlanadi kyuvetalar; qiziqish mintaqasiga qarab, ular qurilishi mumkin stakan, plastik (ko'rinadigan spektrli mintaqa), yoki kvarts (Uzoq ultrabinafsha nurlanish spektri mintaqasi). Ba'zi ilovalar kichik hajmli o'lchovlarni talab qiladi, ular mikro hajmli platformalarda bajarilishi mumkin.

Ilovalar

Eksperimental dastur

Ilovalar bo'limida aytib o'tilganidek, spektrofotometriya DNK, RNK va oqsillarni sifatli va miqdoriy tahlilida ishlatilishi mumkin. Sifatli tahlildan foydalanish mumkin va spektrofotometrlar har bir to'lqin uzunligidagi birikmaning yutilish xususiyatlarini (rangning intensivligini) aniqlash uchun keng to'lqin uzunlikdagi mintaqalarni skanerlash orqali birikmalar spektrlarini qayd etish uchun ishlatiladi.[5] Ko'rinadigan spektrofotometriyaning turli xil usullarini namoyish eta oladigan tajribalardan biri bu har xil oqsillar aralashmasidan b-galaktozidazani ajratishdir. Spektrofotometriya asosan namunangizning umumiy oqsil kontsentratsiyasiga nisbatan qancha miqdordagi tozalanganligini aniqlashda yordam beradi. Afinaviy xromatografiya yordamida B-Galaktosidaza ajratilishi va sinovdan o'tkazilishi mumkin, to'plangan namunalarni ONPG bilan reaksiya qilish va namunaning sarg'ayganligini aniqlash.[3]:21–119 Ushbu sinovdan so'ng namunani ONPG bilan o'zaro ta'sir o'tkazish uchun 420 nm va 595 da Bredford tahlili uchun tozalash miqdori miqdoriy jihatdan baholanishi mumkin.[3]:21–119 Ushbu spektrofotometriyadan tashqari, turli xil oqsil namunalarini tozalash va ajratish uchun SDS-Page elektroforezi kabi boshqa usullar bilan birgalikda foydalanish mumkin.

IQ spektrofotometriyasi

Infraqizil mintaqa uchun mo'ljallangan spektrofotometrlar bu mintaqada o'lchovlarning texnik talablari tufayli ancha farq qiladi. Asosiy omillardan biri bu turli xil spektral mintaqalar uchun mavjud bo'lgan fotosensorlarning turidir, ammo infraqizil o'lchovlar ham qiyin, chunki deyarli har bir narsa IQ nurini termal nurlanish sifatida chiqaradi, ayniqsa to'lqin uzunliklarida taxminan 5 mkm.

Yana bir murakkablik shundaki, shisha va plastmassa kabi juda oz sonli materiallar infraqizil nurni yutadi va uni optik vosita sifatida mos kelmaydi. Ideal optik materiallar tuzlar, ular kuchli singib ketmaydi. IQ-spektrofotometriya uchun namunalar ikkita disk o'rtasida surtilgan bo'lishi mumkin kaliy bromidi yoki kaliy bromid bilan maydalangan va granulaga bosilgan. Suvli eritmalarni o'lchash kerak bo'lgan joyda, erimaydi kumush xlorid katakni qurish uchun ishlatiladi.

Spektroradiometrlar

Spektroradiometrlar, deyarli ko'rinadigan mintaqa spektrofotometrlari kabi ishlaydigan, o'lchash uchun mo'ljallangan spektral zichlik yoritgichlar. Ilovalar ishlab chiqaruvchilar tomonidan sotish uchun yoritishni baholash va toifalashni o'z ichiga olishi mumkin, yoki xaridorlar sotib olishga qaror qilgan chiroqni o'zlarining talablariga muvofiqligini tasdiqlashlari mumkin. Komponentlar:

  1. Yorug'lik manbai namuna ustiga yoki orqali porlaydi.
  2. Namuna nurni uzatadi yoki aks ettiradi.
  3. Detektor namunadagi nurning qancha miqdorda aks etganligini yoki qanday o'tkazilishini aniqlaydi.
  4. Keyin detektor namunaning qancha yorug'likni o'tkazganligini yoki aks ettirilishini raqamga aylantiradi.

Shuningdek qarang

Adabiyotlar

  1. ^ ISO 12647-2: Grafika texnologiyasi - Yarim tonli rang ajratish, isbotlash va ishlab chiqarish nashrlarini ishlab chiqarish jarayonini boshqarish - 2-qism: Ofset litografik jarayonlar. Jeneva: Xalqaro standartlashtirish tashkiloti. 2013. p. 13.
  2. ^ a b Allen, DW; Kuksi, C; Tsay, BK (2009 yil 13-noyabr). "Spektrofotometriya". NIST. Olingan 23-dekabr, 2018.
  3. ^ a b v d e f g h men j Ninfa AJ, Ballou DP, Benore M (2010). Biokimyo va biotexnologiya uchun asosiy laboratoriya yondashuvlari (2-nashr). Xoboken: Wiley & Sons. ISBN  9780470087664. OCLC  488246403.
  4. ^ Shvedt G (1997). Analitik kimyo bo'yicha muhim qo'llanma. Brooks H. Chichester, NY tomonidan tarjima qilingan: Uili. 16-17 betlar. ISBN  9780471974123. OCLC  36543293.
  5. ^ a b v Ninfa AJ, Ballou DP (2004). Biokimyo va biotexnologiya uchun asosiy laboratoriya yondashuvlari. Xoboken: Uili. p. 66. ISBN  9781891786006. OCLC  633862582.
  6. ^ a b Rendina G (1976). Zamonaviy biokimyoning eksperimental usullari. Filadelfiya, Pensilvaniya: W. B. Saunders kompaniyasi. pp.46-55. ISBN  0721675506. OCLC  147990.
  7. ^ Oke, J. B .; Gunn, J. E. (1983). "Mutlaq spektrofotometriya uchun ikkilamchi standart yulduzlar". Astrofizika jurnali. 266: 713. Bibcode:1983ApJ ... 266..713O. doi:10.1086/160817.
  8. ^ Ishani, G (2006). "Birinchi tijorat UV-vis spektrofotometri". Olim. p. 100. Olingan 23-dekabr, 2018.
  9. ^ Simoni, RD; Tepalik, RL; Von, M; Tabor, H (2003 yil 5-dekabr). "Klassik asbob: Bekman DU spektrofotometri va uning ixtirochisi Arnold O. Bekman". J. Biol. Kimyoviy. 278 (49): e1. ISSN  1083-351X.
  10. ^ Bekman, A. O.; Gallavay, V. S .; Kay, V.; Ulrich, W. F. (mart 1977). "Bekman Instruments, Inc-da spektrofotometriya tarixi". Analitik kimyo. 49 (3): 280A-300A. doi:10.1021 / ac50011a001.
  11. ^ "Hewlett Packard: HP 8450 A UV ko'rinadigan spektrofotometr bilan birikma identifikatsiyasi". Analitik kimyo. 51 (12): 1188A-1189A. 1979-10-01. doi:10.1021 / ac50048a728. ISSN  0003-2700.
  12. ^ Ninfa AJ, Ballou DP, Benore M (2015). Biokimyo va biotexnologiya uchun asosiy laboratoriya yondashuvlari (3, rev. Ed.). Xoboken, NJ: Wiley & Sons. p. 77. ISBN  9780470924525. OCLC  915641828.
  13. ^ "To'liq Avtomatik ikki nurli - Atom yutish spektrofotometri (AA 8000)". Laboratoriya jihozlari. Labindia Analitik Instruments Pvt. Ltd
  14. ^ "Spektrofotometriya qo'llanmalari va asoslari". www.mt.com. Mettler-Toledo International Inc. Olingan 4-iyul, 2018.
  15. ^ Trumbo, Toni A.; Shultz, Emerik; Borland, Maykl G.; Pugh, Maykl Eugene (2013 yil 27-aprel). "Amaliy spektrofotometriya: biokimyoviy aralashmani tahlil qilish". Biokimyo va molekulyar biologiya ta'limi. 41 (4): 242–50. doi:10.1002 / bmb.20694. PMID  23625877.
  16. ^ "FastTrack ™ UV / VIS spektroskopiyasi" (PDF). www.mt.com. Mettler-Toledo AG, tahliliy. 2016 yil. Olingan 23-dekabr, 2018.
  17. ^ Kortes, C .; Szepaniuk, A .; Gomes da Silva, L. (2010 yil 1-may). "Proteinlarni tozalash usullarini o'rganish Animatsiyalar biokimyo o'qitish vositasi sifatida". Biokimyo ta'limi jurnali. 8 (2): 12. doi:10.16923 / reb.v8i2.215.
  18. ^ Garret RH, Grisham CM (2013). Biokimyo. Belmont, Kaliforniya: Yopish. p. 106. ISBN  978-1133106296. OCLC  801650341.
  19. ^ Bayram, Ensor Rozlin (1936 yil 27-may). "Oqsillarning spektrofotometriyasi". Biokimyoviy jurnal. 30 (10): 1795–1803. doi:10.1042 / bj0301795. PMC  1263262. PMID  16746224.
  20. ^ Mavrodineanu R, Schultz JI, Menis O, eds. (1973). Spektrofotometriya va lyuminesans o'lchovlarida aniqlik: Ish yuritish. Vashington, Kolumbiya okrugi: AQSh Milliy standartlar byurosi. p. 2018-04-02 121 2. OCLC  920079.

Tashqi havolalar